Dr. Szász Ferenc Ph.D, Dipl. ECAR és Dr. Gábor György Ph.D, Dipl. ECAR*

ANIREP Szaporodásbiológiai Szakrendelő Budapest, 1119. Etele út 28.
T: 205-35-10, 06-20-3122440, Email: anirep@animalrep.axelero.net
*Állattenyésztési és Takarmányozási Kutató Intézet, Herceghalom Gesztenyés út 1.

A laboratóriumi és műszeres diagnosztikában, a közelmúltban végbement fejlődés eredményeképpen lehetőség és szakmai igény merült fel a termékenyítő-képesség zavara pontos, kóroktani diagnózisának felállítására. Ehhez nyújtanak segítséget a hímivarban is egyre gyakrabban alkalmazott endokrinológiai vizsgálatok, valamint az Röntgen- és ultrahang diagnosztika.

Endokrinológiai tesztek

A nemi működés endokrinológiai hátteréről különféle hormon vizsgálatok szolgáltatnak hasznos információt. A vizsgálatok felépítésénél és értékelésénél figyelembe kell venni a hormonok kiáramlásának epizodikus jellegét, így az egyszeri mintavétel általában nem elegendő.

Nemi működés endokrinológiai szabályozása

A hímek nemi tevékenységének hormonális szabályozása sok tekintetben hasonlít a nőivaréhoz, de alapvető különbség a gonádok szintjén jelentkezik, melynek hátterében azok folyamatos működése áll, szemben a nőivar ciklikusságával. A központi idegrendszerben (hypothalamus) termelődő GnRH, epizodikus kiáramlásának hatására a hypophysis elülső lebenyéből LH és FSH leadása indul meg (1. ábra).

Az LH a here Leydig-sejtjeinek tesztoszteron termelését serkenti, az FSH pedig a spermatogenezisre és Sertoli-sejtek működésére gyakorol stimuláló hatást. A termelődő tesztoszteron (valamint a dihidro-tesztoszteron és az ösztradiol aktív metabolitja) negatív feedback révén gátolja az LH leadást és a GnRH kiáramlását is, hiszen a hypotalamus és a hypophysis szintjén egyaránt érvényes ez a hatás. Megfigyelések szerint azonban az ösztradiol által kiváltott negatív feedback egyaránt érinti az LH és az FSH leadást is, melyet figyelembe kell venni az ösztrogén származékok klinikai alkalmazása során. Mivel az FSH és LH leadás nem minden esetben emelkedik együttesen a szervezetben, ezért feltételezhető, hogy a Sertoli-sejtek által termelt gátló hatású hormon, az inhibin és a serkentő hatású hormon, az aktivin, közvetlenül és csak a hypophysisre hatva is befolyásolja az FSH szintet. A tesztoszteron nélkülözhetetlen a Sertoli-sejtekben zajló spermatogenezishez és a mellékhere normális működéséhez, így pl. a spermiumok érési folyamatához is. A szervezetben a tesztoszteron számos helyen átalakul dihidro-tesztoszteronná (DHT) ill. ösztradiollá. A DHT aktív forma, amelyik pl. a prosztatában a mirigy fejlődésére és működésére is hat.

A diagnosztikában a hormonális láncolat (GnRH==>FSH;LH==>Tesztoszteron) egyes szintjeinek működését vizsgáljuk stimulációs tesztek segítségével, és így bizonyos hormonális diszfunkciókra derülhet fény.

Tesztoszteron stimulációs teszt:

A legegyszerűbb vizsgáló módszer a tesztoszteron termelés vizsgálatára. A teszt HCG (44NE/ttkg, IM.) vagy GnRH (2,0ug/ttkg, IM.) adása után vizsgálja a kiindulási hormonszintre adott stimulációs választ. Az alapérték felvétele után HCG esetében 4 órával és a GnRH esetében 1 órával a kezelés után kell vért venni, és meghatározni a tesztoszteron szint emelkedését. A normál stimulációs érték 3,7 és 7,5 ng/ml közé esik. A stimuláció utáni alacsony tesztoszteron-szint primer Leydig-sejt diszfunkcióra utal

Szérum gonadotropin-szint mérés:

A GnRH kezelésre adott FSH és LH szint emelkedését lehet vizsgálni ezzel a módszerrel, de a gonadotropinok gyors epizodikus kiáramlása miatt 20-30 percenként kell vérmintát gyűjteni, így ez a módszer nem gyakorlatias (normál érték LH: 34-85 ng/ml; FSH: 73-84 ng/ml). A stimulációs hormonválasz kimaradása a hypophysis elváltozására utal. A hereszövet működészavara lehetséges, ha magas az LH stimulációs szint, de ugyanakkor alacsony a stimuláció utáni tesztoszteron érték. Az FSH koncentrációjának emelkedése utalhat alacsonyabb inhibin feed-back hatásra, mely lehetséges a károsodott spermatogenezis következményeként. A gyakorlat számára a fent említett, gonadotropinok kimutatására tesztek (kivéve az LH-t) nem állnak rendelkezésre, ezért ezek a vizsgálatok csak kutatási célokat szolgálhatnak.

Műszeres diagnosztikai lehetőségek.
Elsősorban a prosztata és a herék, mellékherék méret és szerkezetbeli elváltozásainak diagnosztizálását segítik.

Röntgen-vizsgálat
A kiegészítő műszeres diagnosztikai vizsgálatok közül az Rtg-vizsgálat bizonyos mértékben alkalmas lehet a prosztata megnagyobbodásának diagnosztizálására, de az ultrahang-vizsgálatok elterjedésével ennek jelentősége háttérbe szorult.

Ultrahang-vizsgálat
Az ultrahang diagnosztika komoly segítséget nyújthat a prosztata és a here megbetegedések pontos meghatározásában.

Prosztata vizsgálata
A prosztata vizsgálatokra 5 és 7,5 MHz-es szektor vagy konvex vizsgálófej, transzkután használva a legalkalmasabb, míg a herevizsgálatokra a 7,5 MHz-es lineáris fej javasolható. A prosztata esetében a szerv hosszanti és haránt irányú vizsgálatát is el kell végeznünk, különös tekintettel a szerv méretére és szerkezetére. Leggyakoribb betegségként a prosztata megnagyobbodás (benignus prostata hyperplasia), a prosztata-gyulladás és a prosztata carcinoma fordul elő.

Differenciál diagnosztika, terápia
Ismeretes, hogy az életkor előre haladtával (5 évnél idősebb állatok) a kan kutyák 85%-ában a prosztata megnagyobbodik a normális méret akár 2-6,5-szeresére, mely az esetleges kapcsolódó gyulladás révén befolyásolhatja az ejakulátum minőségét. Egészséges állatban a prosztata nem tartalmaz baktériumokat és a belőle származó váladék is csak a húgyutakon keresztüljutva, vihet magával mikroorganizmusokat. Akut gyulladásnál azonban, jelentős mennyiségű baktérium (10 000/ml) és gyulladásos sejt találhatók a spermában és/vagy a prosztata váladékban. Ultrahang vizsgálat során szembetűnő lehet a szerv kötőszövetes sövényeinek megvastagodása, mely "kerékküllőre" emlékeztető rajzolatot alkothat, esetleg kötőszövetes infiltráció jelei is láthatók (1. kép).

1. kép. Subakut prosztata gyulladás megvastagodott sövényekkel, és cisztával ill. kezdődő kötőszövetes infiltrációval.

A krónikus prostatitis esetén inkább a spermaminőség romlása, a gyengébb motilitású és az abnormális morfológiájú spermiumok nagy száma figyelhető meg. Gyakran vér keveredik az ejakulátumhoz általában a harmadik frakció során, esetleg spontán véres váladék csepeg a péniszből. Ultrahang vizsgálattal, a megnagyobbodott szerv inhomogén, gyakran számos cisztával az állományában tűnik elő.

2. kép: Idült prosztata gyulladás jelei, centrálisan cystásodó mirigyállománnyal

Az ultrahang vizsgálat során valószínűsített prosztata elváltozások differenciál diagnosztikájában nagy segítséget nyújt a váladék bakteriológiai és citológiai vizsgálata. A Pontos bakteriológiai eredményhez mintavételi módszereként javasolható a steril katéter felvezetése a húgycsőbe a prosztata magasságáig, majd a kíméletes prosztata-masszázzsal kinyert váladékot küldjük el a laboratóriumba. A vékonytű-aspirátiós cytológia mintavételként szintén szóba jöhet, de cysták vagy tályogok jelenléte esetén ez a módszer kockázatosabb, hiszen a szúrási csatornából utóvérzések, vagy peritonitis alakulhat ki. Minden prosztata betegség -a carcinoma kivételével- terápiájának első lépése a tesztoszteron (DHT)-szint csökkentése, melynek legegyszerűbb módja a castratio. Ez természetesen tenyészállatnál nem jöhet szóba. Hormonális úton gesztagénekkel lehet csökkenteni a szerv fejlődéséért felelős hormonhatást, de ezek a szerek libidó csökkenést és spermaminőség romlást okozhatnak.Az un. -reduktáz-gátlók (pl.:finaszterid) azonban, melyek a tesztoszteron-DHT átalakulás gátlásáért felelősek a prosztatában, kedvezőbb hatásúak, mert nem befolyásolják a libidót és a spermatogenezist. A diagnosztizált prosztata-gyulladást heveny esetben bármely, a rezisztencia vizsgálat alapján megfelelő, széles spektrumú antibiotikummal eredményesen kezelhetjük, hiszen ilyenkor sérült a vér-prosztata barrier és minden szer könnyen átjut rajta. A krónikus gyulladás esetén viszont alacsony fehérje kötődésű, kismolekulájú, nagy lipid-oldékonyságú, enyhén bázikus antibiotikumokat részesítsünk előnyben (erythromycin, fluorokinolonok, klóramphenikol, potenciált szulfonamidok). A szükséges kezelési időtartam 4-12 hét. A prosztata carcinoma terápia rezisztens, nem hormonfüggő betegség. Áttétképződésre hajlamos és gyors lefolyása miatt, a prognózis igen rossz (3. kép).

3. kép: Prosztata carcinoma ultrahangos képe kutyában.

Herék ultrahangos vizsgálata

A vizsgálatok lényege, hogy az ultrahang segítségével igen pontos képet kaphatunk a herék szerkezetéről, méretéről és az állomány mélyében lévő esetleges strukturális elváltozásokról. Ennél a szervnél jobban alkalmazhatóak a lineáris vizsgálófejek (7,5-8 Mhz) mint a konvex-fejek, mert nagyobb felületen fektethetők fel a szerv gömbölyű felszínére. A here állományának alapos átvizsgálása során fontos a herecsatornácskák üregének teltségét ill. a kötőszövet megjelenését megfigyelni. Inhomogén gócok, vagy a hereszövet beolvadásából adódó cysták is előfordulhatnak. A haszonállatok esetében olykor-olykor diagnosztizált here-calcificatio nagyon ritka kutyában, a neoplasmák ill. a fibrotikus folyamatok azonban gyakoriak. Tapasztalataink szerint a klinikai esetek 75-80 százalékában az oligospermia, teratozoospermia mellé here és/vagy mellékhere morfológiai elváltozást lehet társítani.

4. kép. Négyéves aktív tenyészkan kutya egészséges heréjének ultrahang-felvétele. Szabályos szerkezet, középen a mediastinum látható, homogén, egyenletesen telt herecsatornácskák lumenének átmetszetei jól láthatóak. Morfológiailag ép here, kiváló spermiogramm társult hozzá.

5-6. kép. Fizikális vizsgálattal nem érzékelhető, centrális, neoplasma gyanús elváltozás tenyészállat heréjében. A sperma minősége ebben az esetben még nem károsodott. Az ép here (jobb oldali kép)valószínűleg még kompenzálni tudta a másik csökkent működését. Műtéti beavatkozáshoz és szövettani mintavételhez a tulajdonos nem járult hozzá.

Az ultrahang vizsgálat olyan rejtett szöveti, morfológiai elváltozásokra deríthet fényt (5-6. kép), melyek sokszor nem diagnosztizálhatók fizikális vagy spermavizsgálattal sem. A here-mellékhere szöveti felépítése utalhat hypoplasiára, gyulladásra, vagy fibrózisra egyaránt. A mellékhere csatornácskáinak átjárható, tág ürege kizárja a spermiostasis fennállását.

I. Hypothyreosis
Orthopédiai problémák
Örökletes defektusok II. Hibás fedeztetési management
tapasztalatlan szuka
alkalmatlan környezet
sérülés, rossz tapasztalat, kondició III. Idiopathikus genetikai faktor

Diagnosztikai és terápiás lépések összefoglalása

I. Csökkent libidó, fedezési nehézségek

Gyenge libidó

I. Hypothyreosis
Orthopédiai problémák
Örökletes defektusok II. Hibás fedeztetési management
tapasztalatlan szuka
alkalmatlan környezet
sérülés, rossz tapasztalat, kondició III. Idiopathikus genetikai faktor

kezelés/ korrekció kezelés/ korrekció nincs kezelési mód

I: A pajzsmirigy mûködésének vizsgálata (TRH-stimulációs teszt) és az esetleges csökkent mûködés kezelése kiegészítõ hormonterápiával, javíthat a fedezési kedven. Az irodalmi adatok szerint a tesztoszteron (T) szint általában nem alacsony ezekben az egyedekben, és kiegészítõ T kezelés egyébként is kontraindikált, hiszen a negatív feed-back hatás miatt csökkenhet az endogén T szint. A fedezést akadályozó, vagy fájdalmat okozó elváltozások mûtéti korrekciója (phimosis, persistent phrenulum penis), megoldhatja a fedezési gondot. Bár felmerül ezek örökletes háttere, és így a kan kizárása tenyésztésbõl megfontolandó.
II: Nyugodt környezet, tapasztalt, receptív tüzelõ szuka jelenléte, ill. fedezésre felkínálása segíthet a pszichés eredetû libidó zavarokon.

II. Infertilitás normál spermiogrammal

Infertilitás normál spermával

I. Nem megfelelõ fedeztetési idõ II. Részletesebb spermavizsgálat III. Kizárni a rövid spermium élettartamot és elnyomni az anti-sperma antibody hatást

Fedeztetés ismert, kiváló fertilitású szukával ovuláció diagnosztika UH vemhesség diagnózis (21-25 nap) Specialista vizsgálatai (EM), kromoszóma Sebészi IU inszeminálás Glükokortikoid (?)

I: Pontos ovuláció diagnosztika után az optimális idõpontban fedeztetni, kiváló fertilitású szukát. A korai magzatelhalás lehetõségét vérszérum progeszteron-szint ellenõrzéssel (hypoluteoidismus megelõzése), ill. korai UH- vemhességvizsgálattal ajánlott kizárni.
II.: Speciális spermavizsgálatok (elektromikroszkópos morfológiai vizsg., Floureszcein-festések, funkcionális-spermavizsgálatok pl. zona pellucida teszt).
III. A rövid spermium élettartam kizárása in vitro tárolási tesztekkel (átlag túlélés: 56h TRIS-bázisú hígítóban) ill. intrauterin sebészi termékenyítéssel az ovuláció után 3-4 nappal.

III. Infertilitás csökkent spermaminõségnél

Azoospermia (halott, mozdulatlan sejtek), oligozoospermia (csökkent számú mozgó sejt), teratozoospermia (morfológiai abnormális sejtek) előfordulása esetén:
Az első lépés fizikális és UH-vizsgálattal a herék fejlettségét megítélni. Meg kell győződni arról, hogy teljes ejakuláció történt-e? Erre alkalmas az erekció kialakulásának megítélése, valamint az ejakulátum ALKP mérése (<10.000IU/l), mivel ez utóbbi csak a mellékheréből ürül. Esetleges retrográd ejakuláció kizárására közvetlenül a spermavétel után vizeletet kell gyűjteni. Bakteriológiai vizsgálattal ajánlatos kizárnia bakteriális infekció fennállását, ill. 4-12 héten keresztül kezelni kell a beteget specifikus antibiotikummal. A hormonális tengely működését endokrinológiai tesztekkel lehet ellenőrizni. Az alacsony tesztoszteron-szint, melynek oka Leydig-sejt elégtelenség lehet, eredményezhet spermium morfológiai rendellenességeket. Ha a spermium anomáliák hátterében csökkent gonadotrop hormon szekréció áll, akkor terápiás célzattal javasolható az un. GnRH kúra (GnRH 2-5 g/ttkg I.M., másnaponta kétszer, 8-12 héten át.). Alacsony FSH-, LH- valamint tesztoszteron-szint hátterében hypophysis daganat is állhat. Oligozoospermiás beteg esetén az igen pontos ovuláció diagnosztika, és a célzott, az optimális periódusban elvégzett termékenyítések jó termékenyülési arányt eredményezhetnek. Abban az esetben, ha a totál sejtszám nagyobb 100x106spermium/ejakulátum koncentrációnál, akkor az LH csúcsot követő 4-5-6. napon a vaginális termékenyítés is jó eredményt adhat. Ha a sejtszám 100-20x106spermium/ ejakulátum közé esik akkor csak a sebészi intrauterin termékenyítés (LH-csúcs után 5. napon) ajánlott.

A termékenyítő-képesség zavara komplex kérdés, diagnosztikája összetett, és terápiája pedig kitartó és sokszor hosszadalmas gyógykezelést jelent. Tapasztalataink szerint az esetek 50%-a rossz prognózisú, és a fennmaradó 50%-on osztoznak a kétes és a jó prognózisú esetek. A siker alapvető feltétele a kóroktani diagnózis felállítása. Összeállításunkkal azt a célt szolgáltuk, hogy céltudatos vizsgálati protokollt követve a gyakorló állatorvos számára is elérhető legyen a pontos, oktani diagnózis.

Irodalom:
-Dr. Haraszti-Dr. Zöldág: Háziállatok szülészete és szaporodásbiológiája. (1993)
-D. Hewitt: Physiology and endocrinology of the male. BSAVA Manual of Small Animal Reproduction and Neonatology (1998):Chapter 6: 61-69,
-L.R.J. Keenan: The infertile male BSAVA Manual of Small Animal Reproduction and Neonatology (1998): Chapter 8: 83-93
-J.A. Barsanti: Prostatic infections: diagnosis and therapy. Bayer Selected Proceedings TNAVC, 1998 January
-S.D. Johnston, K. Kamolpatana, M.V.Root-Kustritz, G.R. Johnston: Prostatic diorders in the dog. Animal Rep. Sci. 60-61 (2000) 405-406